血栓动物模型制备方法介绍医院文章

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攻克血栓性疾病,很多时候就需要成功制备血栓动物模型,以为临床和科学研究提供重要基础。

按照血栓存在的位置,大致分血管内血栓和心腔内血栓两类。制备模型的实验方法较多,都有哪些优缺点?近日中医院吴伟春、王洋等在本刊进行了阐述。

作者指出,血栓动物模型的制备是根据血栓形成所需的条件和原理来进行的。

模型制备的首要考虑因素是实验动物的选择,包括羊、猪、犬、兔子、大鼠以及小鼠等,其中血栓动物模型最常使用的是大鼠和小鼠。

对于血管内血栓模型而言,实验室多选用颈动脉、股动脉、腹主动脉、尾动脉、股静脉、下腔静脉及大脑中动脉等;对于心腔内血栓而言,左心室血栓较为常见。

血管内血栓动物模型的制备

血管内血栓动物模型主要包括动脉和静脉血栓,方法有物理损伤法和化学损伤法两种类型。

其中物理损伤法,是指通过一些损伤性方法破坏血管内膜,使内皮下胶原纤维暴露,从而激活血小板且释放多种生物活性物质,最终启动内源性和外源性凝血途径导致血栓形成。

具体制备方法及注意事项如下:

机械损伤法:用刮匙、银针等器械损伤血管内膜;动静脉血管均适用;此法应注意血管内膜的破坏要达到一定深度,通常数毫米不等。

异物法:在血管腔内放置聚乙烯管、丝线或者钢丝圈等异物;动静脉血管均适用。

结扎法:根据不同动物类型及实验目的,结扎的血管相异;动静脉血管均适用;此法操作简单、重复性好,结扎目标血管数小时即可。

电流损伤法:动静脉血管均适用。

低温加压损伤法:利用低温及加压状态下血流速度减慢远离,操作简单。

化学损伤法:使用一些特殊化学试剂(三氯化铁、角叉菜胶、月桂酸钠、胰蛋白酶、链霉蛋白酶、过氧化氢等)后使内膜受损而形成血栓,不同化学物质作用最后形成的血栓成分也稍有差异。

最常用的是三氯化铁血栓形成法,此方法操作简单、重复性好,最终形成的血栓结构接近于人类自发形成的血栓结构。

光化学法也属于化学损伤法,该法最大优点是避免了对血管的机械损伤、能快速形成血栓,形成血栓的原理也更接近与临床上血栓的发生机制,常用于脑血管疾病的模型制备。

心腔内血栓动物模型的制备

国内尚未见相关文献报道,而国外有少数学者提出心腔内血栓动物模型的制备方法,其中紧紧围绕心血管内皮细胞的损伤、血流状态的改变以及血液凝固性增高等三个条件来制备的。

心血管内皮细胞损伤:射频消融所产生的的高热量可使内皮细胞损伤,可制造心室、心房血栓。不过这种方法所致的血栓大小不易控制,而且容易出现栓塞事件。

血流状态的改变:低流量心脏状态与心内血栓形成息息相关,而心脏骤停被认为是最终的低血流状态。已有学者利用猪心脏骤停模型形成左心室血栓。

但这种方法形成的急性血栓不稳定,在早期除颤或胸外按压几分钟后就会溶解。此外,一旦功能恢复就可能导致栓塞。

目前文献报道较为常见的心腔内血栓模型制备方法是在心肌梗死模型基础上注入止血剂,然后制备心腔内血栓或者附壁血栓。

也有学者在冠状动脉心尖段结扎制造心肌梗死模型后,在心内膜处注射5%苯甲酸钠和单位的凝血酶,最后形成左心室附壁血栓。

血液凝固性增加:主要是指遗传性或者获得性原因所导致的血液高凝状态。

有学者利用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)诱导血液高凝状态,使小鼠左心室血栓形成。此方法在腹腔注射G-CSF大约4周以后可以观察到左心室血栓形成,模型建立时间较长。

来源:王洋,吴伟春.血栓动物模型的制备方法.中国循环杂志,,36:-.DOI:10./j.issn.-..03..

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